酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)四大基本類型詳解:原理、應用及優(yōu)勢
作為免疫學檢測領域的“黃金標準”,酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)憑借高靈敏度、強特異性及操作便捷等優(yōu)勢,被廣泛應用于醫(yī)學診斷、生物制藥、食品安全及科研實驗中。為幫助用戶更深入了解ELISA技術,本文詳細介紹其四大基本類型,涵蓋直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA、競爭ELISA的核心原理、應用場景及技術特點,助力精準選擇實驗方案!
直接ELISA、單一步驟、抗原檢測
原理:將酶標記的特異性抗體直接與固相抗原結(jié)合,通過底物顯色定量目標物。
優(yōu)勢:步驟簡單、耗時短,適用于高濃度抗原的快速篩查,如病毒蛋白檢測。
間接ELISA、二抗放大信號、抗體效價測定
原理:使用未標記一抗結(jié)合抗原后,再利用酶標二抗放大信號,提升檢測靈敏度。
應用:廣泛用于血清抗體效價分析(如HIV抗體篩查)、疫苗效果評估等場景。
夾心ELISA、雙抗體夾心法、高靈敏度檢測
原理:通過兩種特異性抗體(捕獲抗體與檢測抗體)“夾心”結(jié)合目標抗原,顯著減少交叉反應。
優(yōu)勢:適合低濃度、復雜樣本(如細胞因子、腫瘤標志物)的定量分析,靈敏度可達pg/mL級!
競爭ELISA、小分子檢測、藥物殘留分析
原理:樣本中的游離抗原與酶標抗原競爭結(jié)合有限抗體,信號強度與目標物濃度呈負相關。
應用:精準檢測激素、農(nóng)藥殘留、抗生素等小分子物質(zhì),是食品安全與藥物監(jiān)測的核心技術。
類型 | 檢測目標 | 靈敏度 | 適用場景 |
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直接ELISA | 抗原 | 中等 | 快速篩查、高濃度樣本 |
間接ELISA | 抗體 | 高 | 抗體效價測定、疾病診斷 |
夾心ELISA | 大分子抗原 | 極高 | 細胞因子、病毒蛋白定量 |
競爭ELISA | 小分子抗原/半抗原 | 高 | 藥物殘留、激素檢測 |
高靈敏度:可檢測fg~ng級微量物質(zhì);
高通量:適用于96孔板自動化分析;
結(jié)果穩(wěn)定:重復性好,支持定量與定性分析;
成本可控:試劑盒成熟,兼容多種樣本類型(血清、組織液、細胞培養(yǎng)上清等)。
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