ELISA微孔板是酶聯免疫吸附測定（ELISA）實驗中的核心耗材，通常為多孔塑料板，用于固定抗原/抗體、進行反應及檢測。其設計直接影響實驗的靈敏度和準確性。以下從類型、規格及應用范圍展開說明：
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一、ELISA微孔板的類型
1. 按表面處理分類
| 類型 | 表面特性 | 適用場景 |
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| 高結合型 | 表面經親水化處理（如羧基化、氨基化），蛋白吸附能力強 | 適用于低濃度抗原/抗體的固定（如夾心ELISA、競爭ELISA）|
| 中結合型 | 普通聚苯乙烯表面，蛋白吸附能力適中 | 常規ELISA（如間接法、直接法），用于中高濃度目標物的檢測 |
| 低結合型 | 表面疏水或惰性處理（如牛血清白蛋白預封閉），減少非特異性吸附 | 避免非特異性結合的實驗（如檢測含高濃度雜蛋白的樣本|
2. 按檢測方式分類
| 類型 | 顏色/材質 | 檢測方法 |
| 透明板 | 無色透明聚苯乙烯 | 比色法（如TMB、pNPP顯色），通過吸光度（OD值）測量（波長450nm/405nm） |
| 白色板 | 白色不透明 | 化學發光檢測（如魯米諾底物），增強光信號的反射效率 |
| 黑色板 | 黑色不透明 | 熒光檢測（如FITC、Cy5標記），減少背景熒光干擾 |
3. 按實驗需求分類
| 類型 | 特點 | 應用 |
| 預包被板 | 已包被特定抗原/抗體（如抗人IgG、病毒抗原） | 直接使用，省去包被步驟（如商業化ELISA試劑盒） |
| 可拆卸板（條板）| 微孔板可拆卸為單條（8孔或12孔/條） | 靈活處理小樣本量，降低成本 |
| 無菌板 | 經γ射線滅菌，無DNase/RNase | 細胞培養相關ELISA（如檢測細胞分泌的細胞因子） |
二、ELISA微孔板的規格
1. 孔數與排布
| 規格 | 孔數 | 排布方式 | 適用場景 |
| 96孔板 | 8×12孔 | 標準8排×12列 | 常規ELISA實驗（檢測通量適中） |
| 384孔板 | 16×24孔 | 高密度微孔 | 高通量篩選（HTS）、藥物開發、大規模樣本篩查 |
| 24孔板 | 4×6孔 | 大孔設計 | 預實驗優化、低樣本量檢測 |
2. 孔型與容量
| 孔型 | 特點 | 容量范圍 | 適用場景 |
| 平底孔 | 底部平坦，光程均一 | 200-400μL/孔 | 比色法檢測（需均一光路） |
| U型底孔 | 底部為圓弧形，適合混合液體 | 300-500μL/孔 | 樣品孵育、洗滌（減少液體殘留） |
| V型底孔 | 尖底設計，便于液體集中 | 50-200μL/孔 | 小體積反應（如化學發光ELISA） |
3. 材質
| 材質 | 特點 | 適用場景 |
| 聚苯乙烯（PS） | 高透明度、成本低、易加工 | 常規ELISA（比色法） |
| 聚丙烯（PP） | 耐高溫、化學穩定性高 | 高溫包被（如>37℃）或有機溶劑環境 |
三、應用范圍
1. 醫學診斷
- 傳染病檢測：HIV抗體、乙肝表面抗原（HBsAg）、新冠病毒抗體等。
- 自身免疫病：類風濕因子（RF）、抗核抗體（ANA）。
- 腫瘤標志物：AFP（甲胎蛋白）、CEA（癌胚抗原）。
2. 生物研究
- 蛋白定量：BCA法、Bradford法（需預包被標準品）。
- 細胞因子檢測：IL-6、TNF-α（使用預包被抗體板）。
- 信號通路研究：磷酸化蛋白檢測（如Phospho-ERK ELISA）。
3. 制藥與工業
- 藥物開發：抗體藥物效價測定（如Anti-drug Antibody, ADA）。
- 質量控制：疫苗抗原含量檢測、生產工藝殘留物（如宿主細胞蛋白）。
4. 其他領域
- 食品安全：過敏原（花生蛋白、麩質）、毒素（黃曲霉毒素）。
- 環境監測：水中農藥殘留、重金屬結合蛋白檢測。
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四、選型建議
1. 根據檢測方法選擇顏色：比色法用透明板，化學發光用白色板，熒光用黑色板。
2. 根據樣本濃度選擇表面處理：低濃度樣本需高結合板，高濃度樣本可用中/低結合板。
3. 高通量需求選384孔板：適合藥物篩選或大規模流行病學研究。
4. 預包被板省時但成本高：適合標準化檢測（如試劑盒），自包被板靈活但需優化條件。
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通過合理選擇ELISA微孔板的類型和規格，可顯著提升實驗效率和數據可靠性，滿足從基礎研究到臨床診斷的多樣化需求。
