NCTCclone929[Lcell,L-929](小鼠成纖維細(xì)胞)(STR鑒定正確)
- 發(fā)布日期: 2023-11-09
- 更新日期: 2025-10-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 |
上海
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保存條件 |
37℃
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品牌 |
森興研
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貨號 |
PNS-3575
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用途 |
科研
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組織來源 |
咨詢
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細(xì)胞形態(tài) |
咨詢
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是否是腫瘤細(xì)胞 |
否
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保質(zhì)期 |
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器官來源 |
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免疫類型 |
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品系 |
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生長狀態(tài) |
懸浮
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物種來源 |
大鼠
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包裝規(guī)格 |
1×106
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是否進(jìn)口 |
否
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傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動培養(yǎng)瓶
使之浸潤所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間
隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體
里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄
;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)
瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
收貨注意事項(xiàng)
若收到細(xì)胞大片脫落,請按照如下處理方式處理: 1、將培養(yǎng)瓶內(nèi)
所有培養(yǎng)基 轉(zhuǎn)入無菌離心管,離心收集細(xì)胞(1200rpm 3min)去
除舊培養(yǎng)基; 2、用 PBS 重懸細(xì)胞,將所有細(xì)胞收集到一個(gè)離
心管中,再次離心(1200rpm 3min)去除PBS; 3、加入1ml左右0
.25%胰酶重懸細(xì)胞,混勻即可,不能吹打太多次,放入培養(yǎng)箱消化1
-2分鐘。 4、消化好后,用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞團(tuán)分
散,迅速加入3-5ml含血清的培養(yǎng)基混勻以終止消化,離心(1200rp
m 3min)去除胰酶; 5、加入5ml左右的細(xì)胞相應(yīng)的完全培養(yǎng)基
混勻,按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中(首ci傳代推薦1:3)。
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請按照說明書操作
1.收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2.用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面, 顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。 先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)
胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用
基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代U87MG+RFP比例、換液頻率等。
4.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)
依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后, 定期拍照 、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)
5.若觀察到異常或者對細(xì)胞有疑問,請及時(shí)跟代理商或我們聯(lián)系;對于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)注
意事項(xiàng)有疑問的,可跟我們的技術(shù)支持交流。
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